更新时间:2026-01-08
点击次数:
优化水相(缓冲液)和有机相的比例非常重要(甲醇,乙腈和 THF 是常用的有机溶剂)
阳离子化合物:丁烷基磺酸钠(C4)、戊烷基磺酸钠(C5)、己烷基磺酸钠(C6)、庚烷基磺酸钠(C7)、辛烷基磺酸钠(C8)、癸烷基磺酸钠(C10)、十二烷基磺酸钠(SDS)
主要试剂:烷烃(戊烷, 己烷, 庚烷, 辛烷)、芳香烃(苯, 甲苯, 二甲苯)、二氯甲烷氯仿、四氯化碳
辅助试剂:甲基-t-丁基醚(MTBE)、四氢呋喃(THF)、二氧杂环乙烷、嘧啶、乙酸乙酯、乙腈、丙酮、异丙醇、乙醇、甲醇
正相:对立体异构体有很好的分离(Vitamin E等)、保留时间重复性稍差
(1)专门的纯水机或超纯水机:理想的HPLC用水应为18.2M的超纯水,并通过0.22m的滤膜,除去热源、有机物、无机离子等。
2、选择具有与流动相pH相近的pKa的缓冲液(即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液)
3、确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收(在波长210nm附近进行检测时,不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液)
(2)使用后一定要进行清洗,以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用含5%甲醇 的水溶液冲洗30min(1ml/min),再用甲醇冲洗30min。
过滤:0.45um或更小孔径滤膜目的:除去溶剂中的微小颗粒,避免堵塞色谱柱,尤其是使用无机盐配制的缓冲液时。
尼龙66滤膜:适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可以用于强酸,不适用于二甲基甲酰胺。
全量注入:进样量*少为定量环体积的3至5倍,即20l的定量环*少进样60至100l的样品,这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液,达到所要求的精密度及重现性。